Стволовые клетки костного мозга
Историческая справка
В 1908 году на съезде гематологов в Берлине петербургский ученый Александр Максимов ввел понятие «стволовые клетки», таким образом, он создал теорию, согласно которой все клетки крови происходят из одной «стволовой» клетки. Стволовые клетки костного мозга являются предшественниками тканей человека.
Позже, в конце 60-х годов советский ученый, профессор А.Я. Фриденштейн обнаружил отличные от других стволовые клетки (мезенхимальные), которые в настоящее время активно изучаются и находят широкое применение в востановительной медицине. Он первым начал изучать их свойства в своей лаборатории. Эти клетки до сих пор вызывают интерес среди ученых всего мира.
Основные типы стволовых клеток
Клиническое применение эмбриональных СК сопровождается большим риском их онкогенной трансформации. При применении фетальных СК возможен риск вирусного и бактериального загрязнения.
Такие риски отсутствуют при применении «взрослых» стволовых клеток.
В развитых странах эмбриональные и фетальные стволовые клетки запрещены к использованию в клинической практике.
Основные источники «взрослых» стволовых клеток
Стволовые клетки костного мозга человека
В костном мозге существует два типа СК: гемопоэтические, дающие начало всем клеткам крови, и мезенхимальные (МСК), являющиеся клетками предшественниками тканей человека, развивающихся из мезодермы. Эти клетки (МСК) находятся во всех органах и системе человека в небольшом количестве, но наибольшая концентрация этих клеток находится в костном мозге. В культуре они могут воспроизводить сами себя, не превращаясь в клетки других тканей, так как остаются «изначальными».
Как они работают
С возрастом количество МСК в костном мозге снижается, активность этих стволовых клеток заметно уменьшается, соответственно, наступает процесс старения организма. Возникает необходимость активизировать собственные ресурсы организма, и поэтому требуется введение собствтенных или донорских МСК. Они находят пораженные места в организме и начинают активно восстанавливать пораженные ткани и органы. Внутривенное введение МСК в больших дозах (250 — 400 млн) оказывает мощное лечебное воздействие на весь организм, при этом эффект сохраняется длительное время.
У всех пациентов с различной патологией, которым была произведена высокодозная терапия МСК, были получены только положительные результаты.
Применение именно взрослых МСК для лечения заболеваний человека поддерживают Московская Патриархия и Ватикан.
Приоритетные направления нашей деятельности
О технологии
Медицинская технология получения высококачественных мезенхимальных стволовых клеток (МСК) основана на размножении в культуре при строго определенных условиях чистой популяции МСК в большом количестве (100 — 500 млн) из малого исходного количества костного мозга (0,5 — 1,0 мл), получаемого при пункции грудины или подвздошной кости, у пациентов любого возраста. Получаемое количество МСК достаточно для проведения эффективной терапии (локальной, внутривенной).
Медицинская технология предназначена для использования МСК в фундоментальных и научно-прикладных исследованиях (в том числе восстановительная медицина). Преимущество данной технологии перед другими заключается в том, что костный мозг человека является универсальным источником получения МСК, которые, в отличии от стволовых клеток, получаемых из других источников (эмбриональные, фетальные), являются безопасными при их применении в медицинской практике.
Безопасность и эффективность высокодозной внутривенной трансплантации МСК костного мозга человека проверена в эксперименте в клинике.
Области применения МСК
Наиболее перспективными направлениями клинического применения МСК и клеточных продуктов являются:
Ревитализация: омоложение человеческими стволовыми клетками
Достижения в области клеточной медицины вызвал настоящий бум в области геронтологии. Ревитализация (восстановление организма)- новое направление, способствующее замедлению старения и предупреждению развития хронических заболеваний, характерных для пожилого возраста и приводящих к преждевременному изнашиванию организма. После 40 лет начинается прогрессирующее снижение метаболизма и развития атрофических процессов в органах и тканях. Запускается процесс старения. Снижается эффективность физиологической регенерации органов и тканей, накапливается все больше поломок. Эти процессы чаще наблюдаются в артериях и тканях опорно-двигательного аппарата.
Новый принцип ревитализации это введение стволовых клеток, приводящих к обновлению всех органов и тканей к предупреждению развития многих заболеваний, в том числе и онкологических, улучшению общего самочувствия и сохранению хорошего внешнего вида.
У людей с заболеванием сердца и сосудов в крови снижено количество циркулирующих стволовых клеток по сравнению со здоровыми людьми. Ученые полагают, что эти люди «израсходовали» данные клетки или же имеют недостаточное их производство из-за генетических факторов.
Снижение количества собственных стволовых клеток может корректироваться путем их дополнительного введения. Поэтому одним их приоритетных направлений медицинской науки стало использование стволовых клеток для реставрации тканей, разрушенных разными заболеваниями.
Введение стволовых клеток оказывает выраженный омолаживающий и оздоравливающий эффект. Биологический возраст человека снижается. Сначала регулируется работа эндокринной системы, печени, почек и других важных органов, происходит восстановление их функций.
В дальнейшем нормальная работа внутренних органов обеспечивает красивую внешность, здоровую кожу, хорошее настроение, повышение сексуальной активности. Надо отметить, что у лиц старше 70 лет, своих стволовых клеток не очень много и они приобретают признаки клеточного старения и генетического изменения. Использование донорских молодых стволовых клеток, заряженных энергией жизни, целесообразнее использовать лицам пожилого возраста. При этом, обновляются стареющие биологические структуры и реально продлевается жизнь.
Эффект от введения стволовых клеток по данным специалистов:
Банк мезенхимальных стволовых клеток
В структуре лаборатории имеется банк стволовых клеток костного мозга человека.
У пациента или донора производится забор малого количества (0,5-1 мл) костного мозга из грудины или подвздошной кости, что представляет собой обычную процедуру, проводимую во многих медицинских учреждениях в диагностических целях. Из полученного пунктата выделяют стволовые клетки и культивируют до количества (400-500 млн чистой популяции МСК), достаточного и для проведения эффективной терапии, и для последующего замораживания, и хранения.
Банк МСК из костного мозга человека позволяет использовать аутологичные клетки для последующих трансплантаций без повторной пункции костного мозга.
Когда нужна пересадка костного мозга?
Пересадка костного мозга — это метод лечения, который используется при различных заболеваниях крови, преимущественно онкологического характера. Его актуальность постоянно растет, поскольку, согласно данным ВОЗ, только лейкемией и лимфомой заболевают до 600 тыс. человек ежегодно. На сегодняшний день количество трансплантаций, выполненных в мире, приближается к 2 млн.
Что такое костный мозг?
Он представляет собой мягкую губчатую ткань внутри костей. В костном мозге из стволовых клеток производится большая часть клеток крови. На самом раннем этапе развития стволовые клетки называются плюрипотентными — они способны превратиться в любую другую клетку нашего организма. Суть пересадки костного мозга как раз и состоит в том, чтобы у человека появились новые, здоровые плюрипотентные стволовые клетки взамен поврежденных.
Что такое пересадка костного мозга?
Первая успешная трансплантация такого рода была проведена еще в 1968 году. С тех пор процедура многократно совершенствовалась. Сегодня в ней выделяют три этапа:
Зачем нужна трансплантация?
Костный мозг пациента может быть поврежден из-за воздействия многих факторов. Наиболее частым из них становится онкологическое заболевание, которое поражает стволовые клетки, в результате чего они теряют способность дифференцироваться и превращаться в зрелые, функционально полноценные клетки крови.
Иногда ткани костного мозга могут необратимо повреждаться под действием длительной химиотерапии или интенсивного лучевого лечения других типов злокачественных опухолей. Соответственно, пересадка может использоваться для:
Важно понимать, что операция по пересадке костного мозга — крайне сложная медицинская манипуляция. Применять ее следует только при наличии строгих показаний. В каждом отдельном случае риски и преимущества такого лечения должны быть тщательно взвешены в ходе обсуждения с лечащим врачом и специалистами по трансплантации.
При каких заболеваниях показана такая пересадка?
Чаще всего процедуру проводят при следующих патологиях:
Типы трансплантации костного мозга
Классифицируют такие процедуры по типу донора и выделяют следующие виды манипуляций:
Центр трансплантации костного мозга клиники «Анадолу»
На базе нашего медицинского центра с 2010 года функционирует специализированный центр пересадки костного мозга. В среднем врачи «Анадолу» проводят 250 пересадок в год у пациентов от 16 лет и старше.
В состав центра входят амбулатория, клиническое отделение трансплантации костного мозга и три лаборатории: генетического типирования, гемофореза, криоконсервации и обработки стволовых клеток. Наши специалисты — высококвалифицированные трансплантологи и гематологи, владеющие всеми современными методиками пересадки костного мозга. В своей работе они неукоснительно следуют международным протоколам лечения онкологических заболеваний крови и соблюдают все меры предосторожности и безопасности.
Отделение трансплантации костного мозга «Анадолу» работает не только с международным, но и турецким банком костного мозга, который позволяет максимально быстро — всего за несколько недель — подобрать подходящего донора. В мировом регистре этот процесс может занимать несколько месяцев.
Иммунологическая и онкологическая безопасность мезенхимальных стромальных клеток костного мозга
Иммунологическая и онкологическая безопасность аутологичных и аллогенных мезенхимальных стромальных клеток костного мозга
Несомненно, что золотым стандартом клеточной терапии является аутологичная трансплантация мезенхимальных стромальных клеток (МСК), тем не менее, представляет интерес и изучение возможностей аллогенной трансплантации МСК, в связи с их особой ролью в лимфопоэзе, в частности, в положительной селекции Т-лимфоцитов
Аутологичные мезенхимальные стромальные клетки костного мозга
В I-II фазе клинических испытаний были оценены безопасность, выполнимость и гематопоэтические эффекты после в/в введения аутологичных МСК у больных раком молочной железы, перенесших высокодозную химиотерапию с введением гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) [3]. Относительно маленькие объемы костного мозга (25мл) получали при пункции гребня подвздошной кости. При в/в введении аутологичных МСК больным в дозе от 1х10 6 до 2,2х10 6 никаких побочных эффектов не зафиксировано. У 13 из 21 больного культивированные аутологичных МСК были обнаружены в крови в течение 60 мин. после введения, что указывало на выживаемость МСК и короткое персистирование в кровяном русле. Восстановление гемопоэза у этих больных было быстрым (нейтрофилы >500 на 8 день, тромбоциты >20 000 на 8,5 дня). Но из-за того, что всем больным вводились CD34 + –клетки периферической крови, роль аутологичных МСК в восстановлении гемопоэза точно подтверждена не было.
Впоследствии для оценки роли аутологичных МСК в восстановлении гемопоэза были предприняты рандомизированные исследования. Выделили 2 группы больных: те, кому после проведения высокодозной химиотерапии вводились аутологичных МСК в дозе 2х10 6 /кг, и те, кому МСК не вводились. Предварительные данные показали, что аутологичные МСК ускоряют гематологическое приживление [3].
Начато клиническое исследование эффективности трансплантации аутологичных CD133+ клеток костного мозга для стимуляции регенерации печени при её обширных резекциях у онкологических больных и продемонстрировало техническую выполнимость и безопасность процедуры аутологичной трансплантации [4]. Успех высокодозной иммуносупрессивной терапии с трансплантацией аутологичных МСК при системной красной волчанке [5], рассеянном склерозе [6], ревматоидном артрите [7,8], апластической анемии, аутоиммунной тромбоцитопении [9] и ряде других аутоиммунных заболеваний [10] привел к тому, что в ведущих медицинских центрах Европы и США в конце 90-х годов были начаты исследования эффективности этого метода у больных ЯК и БК [11].
Наиболее впечатляющий исход был у больного, страдавшего болезнью Крона с 9-летнего возраста и непрерывно нуждавшемся в терапии на протяжении 7 лет. После аутологичной трансплантации костного мозга по поводу неходжкинской лимфомы у него не было клинических и лабораторных признаков активности БК все последующие годы [12].
Недавно были опубликованы результаты второго открытого исследования по применению аутологичных МСК у больных рефрактерной формой БК [13]. В этом исследовании больным трансплантировали аутологичные МСК, полученные после трех пассажей. У четырех больных индекс Беста снизился с 334 до 226 через шесть недель после введения МСК. Эндоскопическая ремиссия была достигнута у больных колитом, но не с поражением подвздошной кишки. Никаких неблагоприятных побочных эффектов не отмечено.
Следовательно, МСК могут рассматриваться как кандидаты не только для аутологичной, но и для аллогенной клеточной терапии, что может быть более предпочтительно именно при аутоиммунных заболеваниях, так как МСК собственного организма не всегда способны купировать иммунопатологический процесс.
В дальнейшем с учетом иммунологической инертности МСК предприняты попытки к использованию для введения больным аллогенных донорских МСК.
Аллогенные мезенхимальные стромальные клетки костного мозга
В Ирландском Раковом Центре (Ireland Cancer Center) были начаты исследования по введению больным с лимфомами аллогенными МСК, полученных от донора. В некоторых центрах Европы и США изучали введение аллогенных МСК больным с онкологическими и генетическими заболеваниями при проведении аллогенной трансплантации костного мозга или введении периферических стволовых клеток. Предварительные данные свидетельствуют о положительном эффекте от введения МСК по сравнению с контрольной группой. Исследования в этой области продолжаются [14].
Показано, что при аутоиммунных заболеваниях аллогенная трансплантация МСК чаще, чем аутологичная заканчивается долгосрочной ремиссией [15]. Это связано со способностью трансплантируемого материала к нормальному воссозданию иммунной системы или способностью иммунной системы, произведенной донорскими клетками, развивать реакцию трансплантата против аутоиммунных клеток. Последнее предположение подтверждается развитием ремиссии болезни Крона у пациента, которому проведена аллогенная, а не аутологичная трансплантация МСК [16]. За последующее десятилетие существенный терапевтический эффект был зарегистрирован при проведении именно аллогенной трансплантации МСК для лечения многих резистентных форм воспалительных заболеваний, также не отмечено развитие концерогенеза.
В США в группе из 5 больных болезнью Крона, получивших лечение аллогенной трансплантацией по поводу лейкоза, у 3 достигнута ремиссия различной продолжительности вплоть до 10 лет [17]. В Германии из 11 больных ВЗК (7 больных болезнью Крона и 4 с ЯК), которым была проведена аллогенная трансплантация, вышли в ремиссию 10 человек [18]. В обоих исследованиях, после трансплантации аллогенных МСК никаких образования опухолей не вывялено.
Известно, что аллогенные мехенхимальные стромальные клетки (МСК) не обладают иммуногенными свойствами in vitro: они не индуцируют пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов и не являются мишенями для действия NK-клеток, в связи отсутствием антигена гистосовместимости II класса (HLA – II) и низким уровнем экспрессии антигена гистосовместимости I класса (HLA – I) [19]. Так как, комплекс HLA – II главная антигенная система, определяющая выживаемость неродственного трансплантата. Антитела к антигенам HLA I и II класса могут появляться в организме после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) или аллогенных МСК, полученных от неродственных доноров. Это, в свою очередь, может привести к формированию антител, неприживлению или отторжению перелитых МСК, особенно если они водились неоднократно. При появлении антител к антигенам HLA I и II класса после системной трансплантации аллогенных ГСК происходит разрушение клеток, в связи с развитием «реакции трансплантат против трансплантата» и увеличивается риск осложнений. [20,21,22]. Так как, аллогенные МСК не экспрессируют антигены HLA II класса на своих мембранах, таких осложнений не развиваются.
В последние время аллогенные МСК широко используется в трансплантологии при онкогематологических заболеваниях для подавления «реакции трансплантат против хозяина» после пересадки гемопоэтических стволовых клеток [23].
Проведено исследование, оценивающее безопасность метода клеточной терапии [24]. Данные, указывающие на безопасность местной трансплантации МСК, полученные авторами, очень важны, поскольку в эксперименте было показано, что клетки костного мозга, мигрирующие в очаг хронического воспаления желудочно-кишечного тракта, могут стать причиной возникновения аденокарциномы. Катамнестические данные и морфологические исследования биоптатов отрицают образования опухолей у больных через год после проведения процедуры. Слияние клеток костного мозга (ККМ) с клетками кишечного эпителия не инициирует развитие опухоли. По-видимому, ККМ при этом не становятся стволовыми клетками опухоли, а интегрируются с уже развитой опухолью. Это предположение отличается от теории, выдвинутой группой Houghton в модели рака желудка и предполагающей функционирование слившихся клеток как стволовых клеток опухоли [25].
Что касается возможности спонтанной трансформации МСК (онкогенность) in vitro, то этот феномен отмечается только при длительном их культивировании (более 2-х месяцев) в 50% образцов [26]. Длительное культивирование in vitro может закончиться спонтанной трансформацией МСК, в результате чего они приобретут онкогенный потенциал, которые в дальнейшем могут дать начло опухолевым клеткам [27, 28]. Таким образом, длительное культивирование МСК нецелесообразно, так как оно ассоциировано с высоким риском концерогенеза. Поэтому все культуры МСК, предназначенные для клинического применения, необходимо кариотипировать на предмет исключения хромосомных мутаций. Однако тщательнее изучение этого процесса показало, что спонтанная трансформация для МСК, получаемых из клеток костного мозга взрослого пациента, по частоте ниже, а по срокам наступления позднее, чем у стандартных диплоидных культур клеток человека.
Эмбриональные стволовые клетки (ЭСК) практически никогда не отторгаются после трансплантации и не вызывают так называемый «реакции трансплантат против хозяина», так как они не экспрессируют молекулы HLA I и II класса. Однако, трансплантации ЭМК может спровоцировать рост доброкачественных и злокачественных новообразований [29]. Следует, отметить, что не удалось получить роста опухолей при трансплантации МСК в различные ткани иммунодефицитных мышей, что в единичном случае наблюдаются и при трансплантации МСК, полученных при культивировании костного мозга взрослых больных.
С 2008г по 2010г нами в отделении патологии кишечника ЦНИИГ 59 больным проводилась трансплантация аллогенных МСК. Полученные данные показали, что использование аллогенных МСК, выращенных из костного мозга человека-донора у больных ВЗК за 2 года наблюдения не приводило к развитию опухолевого процесса кишечника, что подтверждалось регулярными эндоскопическими исследованиями с проведением множественных биопсий слизистой оболочки кишечника и нормальным уровнем онкомаркеров: СА 19-9, СА 242 и раковой эмбриональный антиген (РЭА) [30].
С 2009 по 2011гг. там же нами было обследовано 25 больных с ВЗК после трансплантации аллогенных МСК для изучения эффективности и безопасности, полученных от HLA–несовместимых доноров). IgG антител к антигенам HLA- I и II класса в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом. Среди 25 больных ВЗК после системной трансплантации аллогенных МСК через 6,12 мес и 2года в образцах крови ни в одном случае не были выявлены IgG антитела к антигенам HLA I- II класса, что коррелировало с улучшением клинической картины (уменьшением или купированием болевого синдрома, нормализация стула и др.) и уменьшением индекса эндоскопической активности. Полученные результаты показали, что отсутствие антител к антигенам HLA I и II класса после системной трансплантации аллогенных МСК свидетельствует не только об эффективности, но и о безопасности трансплантации аллогенных МСК, в связи, с чем специального подбора доноров при трансплантации аллогенных МСК не требуется [31].
В работах, которые проводились в отделении клеточной и экспериментальной лучевой терапии МРНЦ РАМН в рамках утвержденной Президиумом РАМН программы «Новые клеточные технологии – медицине», этот вопрос был изучен для культур МСК, полученных у человека и крыс линии Вистар, на экспериментальных моделях, позволяющих выявить возможное мутагенное, канцерогенное и тератогенное действие [32].
Было показано, что эти эффекты при введении животным МСК в дозах, превышающих принятые для человека (порядка /3-5/х10 6 клеток на кг массы тела) в 5-10 раз, не индуцируются. Основываясь на этих данных, а также на литературных сведениях, Росздравнадзор Минздравсоцразвития РФ в 2006 году выдал МРНЦ РАМН лицензию ФС-2006/206 на методику получения культур МСК, приготавливаемых для проведения научных исследований в области клеточной терапии различных заболеваний человека.
Можно отметить, что в ряде зарубежных стран такие лицензии для проведения медицинских испытаний в области клеточной терапии также выданы, например, в США в рамках разрешения FDA для проведения 2 и 3 фазы изучения эффективности аллогенных МСК человека при лечении стероидустойчивых форм БК (Компания Osiris, препарат промышленного производства Prochimal). В Японии МСК испытываются как агент ослабляющий реакцию «трансплантат против хозяина», развивающуюся у больных лейкозом после высокодозной химиотерапии и пересадки костного мозга [33,34]. Полученные данные расширяют возможности клинического применения МСК костного мозга человека.
Областями медицины, в которых использование аллогенных МСК прошло полный путь изучения от экспериментальных работ до широкого эффективного клинического применения, являются онкология и онкогематология. Полученные положительные результаты экспериментальных исследований позволили перейти к многоцентровым клиническим испытаниям трансплантации аллогенных МСК в различных отраслях медицины.
До широкого внедрения аллогенных МСК в клиническую практику необходимо будет решать вопрос об определении четких клинических, эндоскопических, иммунологических показаний для данного метода лечения. Накопленный клинический опыт свидетельствует, что аллогенная трансплантация МСК имеет ряд преимуществ перед аутологичной трансплантацией, первоначальные результаты демонстрируют безопасность данного метода терапии.
Литература
10. Noort W.A. Kruisselbrink A.B., Anker P.s. et al. Mesenchymal stem cells promote engraftment of human umbilical cord blood-derived CD34+cells in NOD/SCID mice. Exp Hematol 2002; 30: 870-8.
17. Lazarus H., Haynesworth S., Gerson S. et al. Ex vivo expansion and subsequent infusion of human bone marrow –derived stromal progenitor cells (mesenchymal progenitor cells): implications for therapeutic use. // Bone Marrow Transplant 1995: 16: 557-64
18. Koc O., Gerson S., Cooper B. et al. Rapid hematopoietic recovery after co-infusion of autologous culture –expanded human cells (hMSCs) and PBPCs in breast cancer patients receiving high dose chemotherapy // J Clin Oncol. 2000; 18: 307-16
120. Esch J.S., Knoefel W.T., Klein M., Ghodsizad A., Fuerst G., Poll L.W., Piechaczek C., Burchardt E.R., Feifel N., Stoldt V., Stockschlader M., Stoecklein N., Tustas R.Y., Eisenberger C.F., Peiper M., Haussinger D., Hosch S.B. Portal application of autologous CD133+ bone marrow cells to the liver: a novel concept to support hepatic regeneration. Stem Cells. 2005 Apr;23(4):463-70
187. Jayne D., Passweg J., Marmont A., Farge D., Zhao X., Arnold R., Hiepe F., Lisukov I., Musso M., Ou-Yang J., Marsh J., Wulffraat N., Besalduch J., Bingham S.J., Emery P., Brune M., Fassas A., Faulkner L., Ferster A., Fiehn C., Fouillard L., Geromin A., Greinix H., Rabusin M., Saccardi R., Schneider P., Zintl F., Gratwohl A., Tyndall A. European Group for Blood and Marrow Transplantation; European League Against Rheumatism Registry. Autologous stem cell transplantation for systemic lupus erythematosus. Lupus 2004; 13; 3: 168-176
390. Tyndall A., Matucci-Cerinic M. Haematopoietic stem cell transplantation for the treatment of systemic sclerosis and other autoimmune disorders. Expert Opin Biol Ther. 2003 Oct; 3(7):1041-9
359. Snowden J.A., Passweg J., Moore J.J., Milliken S., Cannell P., Van Laar J., Verburg R., Szer J., Taylor K., Joske D., Rule S., Bingham S.J., Emery P., Burt R.K., Lowenthal R.M., Durez P., McKendry R.J., Pavletic S.Z., Espigado I., Jantunen E., Kashyap A., Rabusin M., Brooks P., Bredeson C., Tyndall A. Autologous hemopoietic stem cell transplantation in severe rheumatoid arthritis: a report from the EBMT and ABMTR. J Rheumatol 2004; 31; 3: 482-488
391. Tyndall A., Walker U.A., Cope A. et al. Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells: a review based on an interdisciplinary meeting held at the Kennedy Institute of Rheumatology Division, London, UK, 31 October 2005. Arthritis Res Ther 2007 ; 9 : 301 [published online 29 January 2007, doi:10.1186/ar2103
364. Stasi R., Provan D. Management of immune thrombocytopenic purpura in adults. Mayo Clin Proc. 2004 Apr;79(4):504-22
291. Popat U., Krance R. Haematopoietic stem cell transplantation for autoimmune disorders: the American perspective. Br J Haematol. 2004 Sep;126(5):637-49;
194. Kashyap A., Forman S.J. Autologous bone marrow transplantation for non-Hodgkin’s lymphoma results in long-term remission of coincidental Crohn’s disease. Br J Haematol 1998; 103: 651-652
299. Ramiya V.K, Maraist M., ArforsK.E., Schatz D.A., Peck A.B., Cornelius J.G. Reversal of insulin-dependent diabetes using islets generated in vitro from pancreatic stem cells. Nat. Med., 2000 Mar; 6(3):278–82,85
97. De S.P., Zecca M., Giorgiani G. et al. Resolution of immune haemolytic anaemia with allogeneic bone marrow transplantation after an unsuccessful autograft. Br J Haematol 1999;106:1063–4
235. Lopez-Cubero S.O., Sullivan K.M., McDonald G.B. Course of Crohn’s disease after allogenic marrow transplantation. Gastroenterology 1998; 114:433-440
109. Ditschkowski M., Einsele H., Schwerdtfeger R. et al. Improvement of inflammatory bowel disease after allogenic stem cell transplantation.Transplantation 2003; 75: 1745-1747
240.Majumdar M.X., Keane-Мооrе M., Buyaner D. et al. Characterization 5id functionality of cells surface molecules on human mesenchymal stem cell. J. 5 omed. Sci. 2003; 10: 228-41
17. Apanius V., Penn D., Slev P.R // Crit. Rev. Immunol.-1997. –Vol. 17, N2. –P. 179-224.
18. Mackay I., Rosen F.S. // N Engl. J. Med.-2000.-Vol. 343, N 11.-P. 782-787. 19. Retersdorf E.W., Hasen J.A., Martin P.J. et al. // N. Engl.J. Med.-2001.- Vol.345, N 25. –P. 1794-1800.
1. Fouillard L., Chapel A., Bories D. et al. Infusion of allogeneic-related HLA mismatched mesenchymal stem cells for the treatment of incomplete engraftment following autologous haematopoietic stem cell transplantation // Leukemia 2007; 21: 568-70.
305. Rius J., Nessim A., Nogueras J.J., Wexner S.D. Gracilis transposition in complicated perianal fistula and unhealed perineal wounds in Crohn’s disease. Eur J Surg 2000; 166: 218-222
178. Houghton J., Stoicov C., Nomura S. et al. Gastric cancer originating from bone marrow-derived cells. Science 2004;306(5701):1568-71
34. Daniel Rubio., Javier Carcia- Castro., Maria C. Martin., Ricardo de la Fuente., Juan C. Cigudosa., Alison C., Lloyd and Antonio Bernad. Spontaneous human adult stem cell transformation // Cancer Res 2005; 65: 3035-3039
28. Rubio D., Garcia-Castro J., Martin M.C. et al. Spontaneous human adult stem cell transformation. // Cancer Res 2005; 65: 3035-9.
313. Ruhnke M., Nussler AK, Ungefroren H, Hengstler JG, Kremer B, Hoeckh W, Gottwald T, Heeckt P, Fandrich F. Human monocyte-derived neohepatocytes: a promising alternative to primary human hepatocytes for autologous cell therapy. Transplantation. 2005 May 15;79(9):1097-103
119. Erdo F, Buhrle C, Blunk J, Hoehn M, Xia Y, Fleischmann BK, Focking M, Kustermann E, Kolossov E, Hescheler J, Hossmann K-A, and Trapp T. // Host-dependent tumorogenesis of embrionic stem sell transplantation in experimental stroke. Journal of Cerebral Bloob Flow and Methabolism. 2003, 23:780-785.
150. Князев О.В. Лечение воспалительных заболеваний кишечника аллогенными мезенхимальными стромальными клетками // Докторская диссертация.-2010.-стр 292.
206. Konoplyannikov A.G., Lepechina L.A., Kalsina S.S. e.a. Development of methods for medical application of autologous mesenchymal stem cells (MSC), produced from their cardiomyoblast, and also conditioned media of MSC for therapy of various diseases. In: “Proceedings of the British-Russian workshop in association with the European Commission «Stem cells: policy, research and innovations. European Union – Russian Federation Perspectives», 2007: 86-90
395. Unger C., Skottman H., Blomberg P. et al. Good manufacturing practice and clinical-grade human embryonic stem cell lines. Human Molecular Genetics. 2008; 17(1): 48-53
376. Taupin P. OTI-010 Osiris Therapeutics/JCR Pharmaceuticals. Curr Opin Investig Drugs. 2006; 7(5): 473-481
